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当PCR引物的GC含量过低时,如何调整PCR系统

时间:2019-10-06  ¦  整理:站长每日一帖  ¦  点击:次  ¦  我要收藏
当PCR引物的GC含量过低时,如何调整PCR系统
质量响应

Gyesang(联络站TA)您的PCR模板是什么?
PCR的目的是什么?
在设计引物时,引物的GC含量之间的升序和降序之间的差异不应太大。您可以尝试以下达阵。
如果您不想打扰降落PCR,如果您想在设置梯度PCR时保持稳定,降低两个cicelyzh引物的上下温度(内部接触TA),稍微设计引物序列它可以更长,弥补低Tm问题。
你所说的百分比差异并不大。
如果两种引物的tm不同,则认为PCR的退火温度低。
添加切割位点的引物的Tm应根据不包括切割位点的序列计算。
西克肖(TA在车站联系)GC含量超过50%。否则,退火温度不会升高,建议重新涂刷底漆(工位中的TA)。测试PCR梯度策略。


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